E feito um estudo da ultra-estrutura da forma epismastigota do Trypanosoma cruzi mantida em meio de cultivo acelular. O núcleo das formas em divisão apresenta um aspecto homogêneo. Microtúbulos intranucleares são observados durante a divisão. No entanto, a membrana nuclear permanece íntegra. O citoplasma apresenta-se com vacúolos de dimensões e aspectos variados. Com o método do ácido periódico-tiosemicarbazida-proteinato de prata, polissacaríáeos e/ou glicoproteínas foram localizados na membrana celular e na membrana que delimita certos vacúolos citoplasmáticos.

In this paper the fine structure of the epimastigotes forms of Trypanosoma cruzi maintained in an acellular culture medium, is described. During division the nucleus shows a homogenous structure owing to the dispersion of its chromatin and nucleolar material. Microtubules similar to those of a mitotic spindle in metazoan cells appear, running frorn one pole to the other. During the whole process of division the nuclear membrane remains intact. The cytoplam shows many vacuoles. With the cytochemical method of acid periodic-thiosemicarbazide-silver proteinate, a polysaccharide surface coat is observed on the whole surface membrane system of T. cruzi. A positive re- action is also observed in the membranes of some vacuoles in the cytoplasm of the parasites.

Há muito tempo é sabido serem as aves refratárias ao "T. (S.) cruzi". Em trabalhos anteriores verificou-se que nas galinhas pode-se obter infecções "in ovo" diagnosticáveis até o 21º de incubação, porém, logo após o nascimento os pintos mostram-se refratários ao parasito, que é destruído no ponto de inoculação. Neste trabalho verificou-se que tripomastigotas injetados diretamente no sangue, podem ser esporadicamente encontrados até 1h depois. Verificou-se também que galinhas bursectomizadas, com associação de testosterona "in ovo" e ciclofosfamida nos 4 primeiros dias de vida permanecem refratárias. Entretanto, o soro dessas aves perde a capacidade lítica que o soro das aves normais possui para os epimastigotas do "T. (S.) cruzi", pela qual são responsáveis as gama-globulinas séricas, conforme foi verificado após o fracionamento do soro em coluna de DEAE-Sefádex A50. A dissociação dos 2 fenômenos, mostra que a capacidade lítica pode ser atribuída a um "anticorpo natural" - uma vez que é eliminada ou grandemente diminuída com a supressão do sistema imunitário bursa- dependente - porém, o mesmo não se pode concluir quanto à refratariedade. Esta, provavelmente, deve estar relacionada ao próprio metabolismo celular após o nascimento.

The refractory state of birds to the "T (S) cruzi" is well known since long ago. In previous papers it was possible to observe in chicks, infection "in ovo", still present at the last dat of incubation. Nevertheless after hatching the chicks become refractory to the parasite. The destruction of the parasites takes place in the skin at the inoculation point. Throughout these studies the authors verified that the trypomastigotes forms disappear within an hour, after being injected directly into the blood stream. Bursectomized chicks by treatment with testosterone "in ovo" plus cyclophosphamide in the first four days of life, show also the refractory condition, but their sera lack the lytic capacity to the epimastigotes of "T. (S.) cruzi", which is peculiar to normal chicken sera. Fractionation of chicken sera in column of DEAE Sephadex-A50 led to the conclusion that the gammaglobulins are the principal responsible for these lytic capacity. The dissociation of the two phenomena shows that the lytic capacity must be attributed to a "natural antibody" - since it is eliminated or become greatly reduced by depression of the immunity bursa-dependent system. Regarding to the refractory condition, the same conclusion cannot be drawn. Perhaps it is related to cellular metabolism after the process of hatching.

Como a produção de oocistos pelo T. gondii no gato parece vinculada à forma cística, uma vez que ela não ocorre pela ministração de formas vegetativas (17), cérebros de camundongos e ratos, com infecção crônica de T. gondii, forma ministrados "per os" a um total de 32 gatos. Com uma amostra (TC1) nenhum dos 8 gatos experimentados eliminou oocistos atribuiíveis a T. gondii; e com as outras 3 amostras a produção de oocistos foi de 25% ("pombo") e 37,5% ("sonia" e "AS-28"). Esses resultados forma atribuídos, em parte, à pobreza de cistos nos cérebros ministrados aos gatos; e, em parte, à existência em condições naturais de amostras de "T. gondii" oocistogênicas, paucloocistogênicas e noocistogênicas. Ao contrário dos gatos infectados com formas vegetativas (17), nenhum gato morreu de toxoplasmose; microscopicamente as lesões com toxoplasmas foram de pouca intensidade e o número de reações de Sabin-Feldman (RSF) negativas foi, relativamente, elevado. Foram vistas raras formas evolutivas do T. gondii no epitélio intestinal de um gato, não parasitado por Isospora as quais são menores que as de I. felis e I. rivolta, do mesmo modo que os seus oocistos. Assim como parece não existir imunidade entre as Isospora (I. felis e I. rivolta), também parece não existir imunidade entre estas e o T. gondii. Em 185 gatos examinados, foi encontrado um deles com oocistos de T. gondii em condições naturais (0,54%). É discutida a importância do gato na epidemilogia da toxoplasmose, destacando-se que a descoberta do ciclo sexuado, decisiva para a classificação do parasito, parece não ter tido repercussão semelhante na epidemiologia.

As the production of oocysts by T. gondii in the cat seems to be correlated with the cystic form, once it does not occur when vegetative forms are given to cats, (17), brains of mice and rats with T. gondii chronic infection were orally administered to 32 cats. With TC1 strain none of the eight cats inoculated excreted Toxoplasma-type oocysts. With the 3 other strains the results were the following: "pombo" strain - 25%; "AS-28" strain - 37,5% and "sonia" strain - 37,5%. These results were interpreted partially as a consequence of the scarcity of cysts in the brains adminstered to cats and partially due to the existence in natural conditions of T. gondii strain which may be oocystogenic, paucioocystogenic and anoocystogenic. Diverselly from the results obtained when cats are fed with vegetative forms (17), none of the inoculated animals died on account of toxoplasmosis; microscopically the lesions with toxoplasms were very few and the number of negative RSF was relativelly high. A few evolutive forms of T. gondii were also studied in the gut epithelium of a cat without Isospora and, in the same manner as the oocystes, they are smaller than those of I. felis and I. rivolta. As cross immunity seems not to occur between the species of Isospora (I. felis and I. rivolta) it is possible that the same happens between the last ones and T. gondii. From a total of 185 cats examined only one (0,54%) excreted (in natural conditions) oocysts atributable to T. gondii. The role of the cat in the epidemiology of Toxoplasmosis is discussed emphasizing the fact that the discovery of the sexual cycle was decisive for the classification of the parasite, but was probably not so valuable for the epidemiological studies.

"A refratariedade das galinhas ao T. (S.) cruzi, ocorre desde o nascimento e não é eliminada pela bursectomia hormonal. Noventa e oito pintos de 1 a 15 dias de vida (normais ou tratados com testosterona) inoculados com o T. (S.) cruzi foram negativos. Deste modo, dificilmente a refratariedade poderia ser interpretada como decorrência de um "anticorpo natural", uma vez que a bursectomia provoca uma queda na produção de anticorpos e das gamaglobulinas. Em cerca de 50% de ovos embrionados (normais ou tratados com o hormônio) foram vistos flagelados do 4º ao 12º dia de inoculação, observando-se ninhos de amastigotos em alguns embriões. Os pintos nascidos dos mesmos grupos dos ovos examinados e positivos, foram sistematicamente negativos pelo exame do sangue. Um deles sacrificado horas depois de nascido, mostrou amastigotos no coração, mas esses parasitos pareciam degenerados. Provavelmente, se alguns chegam a evoluir para tripomastigotos, estes são destruídos á medida que as células hospedeiras se rompem, e assim jamais são encontrados no sangue circulante.

It has already been shown that the refractory state of chickens toward "T. (S.) cruzi" appears early at time of hatch. Fifty-four normal newly hatched and inoculated chicks were negative. it has also been verified that this refractory state persists even after hormonal bursectomy (eggs being injected with 2.5 mg of testosterone). Forty-four bursectomized and inoculated newly hatched chicks were negative. If we consider the fact that bursectomy causes a deficiency in the production of antibodies and gammaglobulins, the refractory state seems not to occur on account of a "natural antibody". Inoculations of "T. (S.) cruzi" made in 153 eggs (normal or treated with testosterone) produced infections of variable intensity in about 50% of them. Although chicks newly hatched from the same groups were always negative. As we have some embryos to be positive until the 21st day of incubation it seems probable that some of those not previously examined and from which these chicks were hatched might have been positive too. Nevertheless, all of them have not parasithemia. So, something happens near the time of hatch that turns the organisms of birds an unfavorable environment to the parasites. The most impressive idea is that in several of the positive embryos the parasites found were remainders of the inoculum and resulting of the infection of the chorioallantoic membrane and its surrounding blood vessels. However there is no doubt that in some embryos invasion of tissues by the parasites definetely occured with amastigote multiplication forms specially in the heart and liver. These amastigotes could persist for sometime after hatching but it seems that they degenerated and only excepcionally could accomplish its evolution to trypomastigote forms. And even when this happened the flagellates were destroyed as soon as the host cells burst. Probably that is the reason why they were not met in the peripheral blood. Parasithemia of the embryos results mainly of extracellular multiplication. Epimastigotes in binary division are very frequent.

Quatro frangos e três pombos (1ª e 2ª experiências) não se infectaram com o "T. (S.) cruzi" (amostra Y), injetados na pele com doses de 9,8 x10*5 a 3,8 x 10*6 parasitos (mistura de formas de cultivo tripomastigotos sangüíneos). Em outros 2 frangos (6ª experiência), a refratariedade não foi rompida com, respectivamente, 5 injeções peritoneais em dias alternados, de 2,8 x 10*6 a 6,1 x 10*6 parasitos, e 5 injeções peritoneais diárias do conteúdo de um cultivo suspenso em salina, adicionado de tripamastigotos sangüíneos, obtidos de 3 camundongos jovens infectados. E, ainda em outros 2 frangos (7ª experiência), a refratariedade não foi rompida associando-se a doses peritoneais de 8,1 x 10*6 e 3,5 x 10*7 parasitos, respectivamente, a ministração de dexametasona, seja com o início da droga no mesmo dia da inoculação (0,4 mg/8 doses/10 dias), seja com o ínicio da droga 3dias antes do dia da inoculação (0,4 mg/10 doses/12 dias). Nessas 11 aves a refratariedade foi comprovada pela inoculação do sangue em camundongos albinos recém-nascidos (total de 54 inoculaçoes negativas em 301 camundongos); e por 52 xenodiagnósticos negativos (total de 175 larvas e adultos de Triatoma infestans e Panstrongylys megistus). As inoculações e os xenodiagnósticos foram feitos entre 1 hora (h) e 96 h e aos 10, 20 e 30 dias depois da inoculação das aves. (Quadro 1). Portanto, além da refratariedade, ficou demonstrado que os parasitos não passam para o sangue circulante das aves. em 10 frangos (3ª, 4ª e 5ª experiências) inoculados na pele com, 1,9 x 10*6 a 3,7 x 10*6 parasitos, verificou-se a duração da viabilidade dos parasitos nas áreas injetadas. Estas foram puncionadas de 1/2 com 1/2 hora, e o material obtido microscopado e inoculado em camundongos recém-nascidos. De 17 inoculações feitas até às 8:30 h, doze foram positivas, inclusive a última; e de 13 inoculações feitas entre 9 e 90 h (as 4 primeiras ainda de 1/2 em 1/2 h), todas foram negativas. Por outro lado, de 10 xenodiagnósticos feitos nas áreas injetadas, entre 1/2h e 9 h após a inoculação das aves, apenas 2 foram positivos; e de 10 xenodiagnósticos feitos entre 9 e 90 h, todos foram negativos. (Quadro 2). Em 4 frangos (8ª experiência), 10 xenodiagnósticos foram feitos entre 1 e 10 h, sendo 2 positivos (7 h e 8 h). Apesar de dificuldades operacionais na execução dos xenodiagnósticos, nas condições experimentais deste trabalho, eles se mostraram inferiores ás inoculações em camundongos recém-nascidos, como prova diagnóstica laboratorial. Portanto, verificou-se que ainda são encontrados parasitos viáveis nas áreas injetadas, pelo menos até ás 8:30 h depois inoculação. todavia, a partir de 2 h após a inoculação os parasitos diminuem de número progressivamente nas áreas injetadas, ao mesmo tempo que mostram sensíveis alterações morfológicas, encontrando-se também muito deles mortos. Ao exame direto, não mais foram vistos depois das 5:30 h. As inoculações provocam na pele dos frangos...

In experiments number one and two, four chickens and three pigeons were not infected when subjected to skin inoculations containing parasites doses of 9.9 X 10*5 and 3.8 X 10*6 both from culture plus blood borne forms. In experiment number 6 the refractory state was not broken when two other chickens received every other day 5 intraperitoneal injections of 2.8 X 10*6 to 6.1 X 10*6 parasites or 5 intraperitoneal injections daily of the parasites from a culture tube suspended in saline plus blood borne forms from 3 infected young mice. The refractory state was not broken also in two chickens from experiment number 7, where dexamethasone was associated to the intraperitoneal parasites doses of 8.1 X 10*6 and 3.5 X 10*7, respectively. This drug was administered either on the first day (0.4 mg/8 doses/10 days) or three days prior to the inoculation (0.4 mg/10 doses/12 days). In these 11 birds the refractory state was proven following blood inoculation to newborn albino mice (54 negative inoculations in 301 mice), 52 negative xenodiagnosis tests (175 larvae and adults from Triatoma infestans and Panstrongylus megistus). The inoculations and the xenodiagnosis were performed between 1 and 96 hours and on the 10th, 20th and 30th days after the bird were inoculated. Therefore, besides the refractory condition it was alsoshown that the parasites do not enter the peripheral blood. Table 1. In the experiments number3, 4 and 5, a total of 10 chickens were inoculated in the skin with 1.8 X 10*6 to 3.6 X 10*6 parasites and viable forms were found in the site. In these areas punctions were made every half-anhour and the harvested material inoculated into newborn mice. From 17 inoculations performed within 8½ hours, 12 were positive, including the last one; and from 12 performed between 9 and 90 hours (the first four still made every half-and-hour), all were negative. On the other hand, from 10 xenodiagnosis made in the sites of inoculation between hal-and-hour and 9 hours after inoculation, two were positive; and all xenodiagnosis performed between 9 and 90 hours were negative. When 10 xenodiagnosis were repeated in 4 new chickens (experiment number 8) between half-an-hour and 10 hours only 2 were positive (7 and 8 hours). Table 2 . The xenodiagnosis under the experimental conditions of this work, as a laboratory diagnostic test, was inferior to the newborn mice inoculation. Then viable parasites were still present in the inoculated areas at least 8½ hours after inoculation. However, the number of parasites decreased progressively in the inoculated areas, 2 hours after inoculation, showing at the same time clear morphological alterations as well as many dead forms. Under direct examination none was seen after 5½ hours of inoculation. The inoculation cause an inflammatory picture of chicken skin that envolves both the adipose tissue and muscles leading to abscesses formation. Phagocytosis which is chiefly produced by heterophil leucocytestakes place...

O trabalho refere as observações feitas em 1947 em um foco de leishmaniose muco-cutânea na Baixada Fluminense (Estado do Rio de Janeiro, Brasil). A existência da moléstia como uma endemia na região foi comprovada pelo encontro de 21 cicatrizes típicas, reagindo positivamente à intradermo-reação com antígeno específico, algumas datando de 5 a 15 anos. Na época dos trabalhos, entretanto, foi constatado um "surto epidêmico", o qual coincidira com uma grande derrubada florestal para fabrico de carvão vegetal. De 306 pessoas examinadas (cêrca de 50% da população local), foram encontradas 39 com lesões leishmanióticas (12,7%). Dentro e fora dos domicílios foram capturados Phlebotomus intermedius. Em 12 cães examinados foi encontrado um com diagnóstico provável da moléstia. Quinze gatos examinados mostraram-se negativos e, do mesmo modo, 28 mamíferos silvestres de pequeno porte. Dos 39 paciente, 4 tinham lesões mucosas (10,3%); 16 apresentavam lesões múltiplas (41,0%); e 19 eram mulheres (48,7%). Havia absoluta predominância das lesões nas partes descobertas do corpo. Cêrca de 1/3 dos casos era em crianças até 10 anos, atestando uma intensa transmissão domiciliária. Existiam casas com 2 a 6 enfermos. Com base nos informes dos pacientes ou responsáveis quanto ao tempo de doença (e admitindo-se um período incubativo médio de 2 meses), conclui-se que, provàvelmente, a grande maioria das infecções se dera entre julho e novembro, coincidindo com a derrubada florestal acima citada. Em 36 casos foi feita a intradermo-reação de Montenegro, obtendo-se respostas duvidosas em 2 e positivas em 34, com intensidade variável. Foram feitas 18 biópsias. Na epiderme havia hiperacantose e, freqüentement, pseudoepiteliomatose com globos córneos e microabcessos; e na derme observaram-se 2 quadros característicos: ou um infiltrado de plasmócitos predominantes, ou uma reação granulomatosa, os quais, às vêzes, se associavam. Em geral, a granulomatose ocorria nos casos mais antigos, isolada ou associada à infiltração, que predominava nos casos mais recentes da enfermidade. A granulomatose traduziria um estado hiperérgico do organismo, uma vez que os indivífuos que a apresentaram tinham maior tempo de doença e reagiam fortemente à intradermo-reação. As leishmanias nunca se mostraram muito numerosas nos cortes estudados. Em 3 paciente foi observada cura espontânea. Foram tratados 26 doentes, sendo 18 com tártaro emético, 4 com "fuadina" e 4 com ambos os remédios. O tártaro mostrou-se tóxico, embora desse resultados tão bons quanto a "fuadina". Dois paciente com lesões da mucosa nasal não se curaram completamente, não obstante terem recebido ambos os remédios. Cinco anos depois dêste inquérito contatou-se pràticamente a extinção dêste foco de leishmaniose. Durante êsse tempo tinham sido feitas aspersões domiciliárias periódicas com o DDT para combate à malária (NERY GUIMARÃES & BUSTAMANTE, 1953).

The paper reports a survey made in a focus of muco-cutaneous leishmaniasis in a locality of the lowlands of the State of Rio de Janeiro, Brazil (Baixada Fluminense). The existence of the disease as an endemic of the region was confirmed by the finding of 21 cases with typical scars and responding positively to Montenegro's intradermo-reaction with specific antigen and some of them dating back from 5 to 15 years. At the time of the survey, however, an epidemic outbreak was discovered, coincidig with a great felling of trees for the making of charcoal. Out of 306 persons examined (50% of the local population), 39 presented leishmaniotic lesions (12,7%). Both within the houses and outside, adults Phlebotomus intermedius were captured. From 12 houses, 136 specimens were captured (11,3 per house). Out of 23 dogs examined, one was found with a probable diagnosis of elishmaniasis. Fifteen cats were found negative, as well as 28 small wild mammals. From the 39 patients, 4 had mucous lesions (10,3%), 16 presented multiple lesions (41,0%), and 19 were female (48,7%). There was an absolute predominance of lesions on bare parts of the body. About one third of the cases were children of 10 years or less, confirming the intense domiciliary transmission. Some houses had 2 to 6 patients. On basis of informations furnished by the patients of by their relatives as to the time elapsed since the beginning of the infection, and admitting an incubation period of 2 months, it is possible to conclude that the great majority of infections probably occurred between July and December, coinciding with the great felling of trees already referred to. In 36 cases Montenegro's intradermo-reaction was made, with 2 doubtful and 34 positive results of variable intensity. Eighteen biopsies were made, the epidermis presenting hyperacanthosis, and frquently pseudoepitheliomatosis with corneous globules and micro-abscesses. The dermis showed two characteristic pictures: an infiltration with predominance of plasmocytes or a granulomatous lesion with epithelioid and giant cells. In general, granulomatosis occurred in older cases, isolated or associated to infiltration with plasmocytes. It seems that granulomatosis represents a hyperergic condition of the infected organism, as the patients who showed it had the disease for a longer time and reponded strongly to the intradermo-reaction. Leishmaniae were not numerous in sections. Three patients showed spontaneous cure. Twenty six patients were treated, 16 with tartar emetic, 4 with "fuadin" and 4 with both these drugs. Some of the patients treated with tartar showed toxic symptoms, although the results were as good as those obtained with "fuadin". Two patients with nasal mucous lesions were not cured, notwithstanding the use of both these drugs. Five years after this survey, muco-cutaneous leishmaniasis was absent from the region, probably as a consequence of several preiodical DDT house sprayings to combate malaria during the intervening years (NERY GHIMARÃES & BUSTAMANTE, 1953).

Em 2 experiências, 8 Hamsters inoculados com material direto de lesões boubáticas (Treponema pertenue), desenvolveram lesões cutâneas consideradas específicas, pelo aspecto clínico e histopatológico e pela presentça de treponemas. Essas lesões se manifestaram no escrôto, testículo, prepúcio, anus, cauda, focinho, dorso e patas posteriores (face palmar). Nos órgãos internos não foram vistos treponemas ao exame direto e, uma vez, por inoculação de cérebro, baço e gânglio linfático. O período incubativo foi de 35 dias pela via testicular, 55 dias pela via escrotal e 107 dias pela via peritonial. Foram obtidas sub-inoculações positivas para Hamsters normais. As experiências continuam. De 4 fêmeas normais, acasaladas com 4 hamsters infectados apenas 2 mostraram lesões positivas resultantes de contágio direto. Aparentemente, não houve copulação e, se esta ocorreu, não determinou fecundação.

In two experiments, 8 Hamsters inoculated with material from yaws lesions (Treponema pertenue), developed skin lesions considered specific by their clinical and histopathological aspects and by the presence of treponemae. These lesions appeared on the scrotumm, testicle, prepuce, anus, tail, muzzle, back and hinders paws (palm surface). In the internal organs no treponemae were found in direct examinations and inoculation of brain, spleen and lymph node. The incubation period was of 35 days for the testicle, 55 days for the scrotum and 107 days for peritoneal cavity inoculation. Positive sub-inoculations were obtained. The serum reactions (Qasserman's and Kahn's) were negative in all 5 tested Hamsters. Out of 4 normal females matched to infected males two developed nasal lesions resulting from direct contact. Apparently the genital lesions hindered copulation. Hamsters are very well suited for an experimental study of yaws.